10.3872/j.issn.1007-385X.2010.06.003
siRNA干扰CHRNA5基因的表达抑制尼古丁对人肺癌细胞的促增殖作用
目的:研究siRNA干扰尼古丁乙酰胆碱受体α5(cholinergic receptor nicotinic alpha 5,CHRNA5)基因表达后对尼古丁促人肺癌A549细胞增殖作用的影响.方法:设计并合成CHRNA5-siRNA片段,并经脂质体介导转染A549细胞.荧光定量PCR、Western blotting检测转染后A549细胞中CHRNA5 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测CHRNA5-siRNA对尼古丁促A549细胞增殖作用的影响.结果:成功构建了CHRNA5-siRNA并成功转染A549细胞.CHRNA5-siRNA转染组A549细胞的CHRNA5 mRNA表达量明显低于si-NC转染对照组(0.196±0.044 vs 0.944±0.027,P<0.01),CHRNA5-siRNA转染组A549细胞的CHRNA5蛋白表达量明显低于si-NC转染组(0.267±0.031 vs 0.745±0.035,P<0.01).在无尼古丁作用时,CHRNA5-siRNA的转染不能抑制A549细胞的增殖.在尼古丁作用下,A549细胞增殖显著增加(P<0.01),CHRNA5-siRNA转染可明显抑制尼古丁的促增殖作用(P<0.01).结论:siRNA下调肺癌A549细胞中CHRNA5的表达可以抑制尼古丁促细胞增殖作用,CHRNA5可能是肺癌治疗的潜在靶点之一.
α5-尼古丁乙酰胆碱受体(CHRNA5)、siRNA、肺癌、尼古丁、增殖
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R734.2;R730.54(肿瘤学)
中国博士后科学基金特别资助项目200902575;济南留学人员创业计划项目20080407
2011-03-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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