Survivin-pPRIME-IGF1R-miR30慢病毒载体的构建及其对肝癌细胞生长的抑制

摘要：

目的:探讨survivin启动子调控的重组慢病毒survivin-pPRIME-IGF1R-miR30载体(简写为sur-IGF1R-miR30)对肝癌Hep3B细胞IGF1R表达和细胞生长的影响.方法:PCR扩增survivin启动子,构建sur-pPRIME;将针对IGF1R基因的干扰序列与sur-pPRIME载体连接,构建sur-IGF1R-miR30慢病毒载体.将sur-IGF1R-miR30、psPAX2和pMD2G质粒共转染293T细胞,扩增慢病毒,检测病毒滴度.以sur-IGF1R-miR30感染人肝癌Hep3B细胞和胎肝L-02细胞,RT-PCR、Western blotting检测Hep3B细胞IGFIR的表达,CCK-8法检测Hep3B细胞的生长.结果:成功构建survivin启动子调控的慢病毒载体sur-IGF1R-miR30,滴度为4.58×109PFU/ml.Sur-IGF1R-miR30感染后,Hep3B细胞中特异表达荧光蛋白,L-02细胞中基本没有表达.Sur-IGF1R-miR30感染Hep3B细胞可阻断IGF1R mRNA和IGF1R蛋白的表达.Sur-IGF1 R-miR30感染抑制肝癌细胞的生长,第7天时的抑制率达60%(P＜0.05).结论:成功构建的重组慢病毒载体sur-IGF1R-miR30可有效地降低肝癌细胞中IGF1 R的表达,抑制肝癌细胞的增殖.

关键词：肝肿瘤、人胰岛素样生长因子1类受体、survivin启动子、慢病毒、RNA干扰

所属期刊栏目：17

分类号：R735.7;R730.54(肿瘤学)

资助基金：江苏省高校自然科学研究基金09kjb320018

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：302-307