10.3872/j.issn.1007-385X.2009.02.005
缺氧促进5HRE和AFPp调控的NTR/CB1954自杀基因系统特异杀伤HepG2细胞
目的:研究5拷贝缺氧反应元件(5HRE)和甲胎蛋白启动子(AFPp)联合调控的自杀基因系统硝基还原酶/CB1954(nitro-reductase/CB1954, NTR/CB1954)在缺氧环境下对人肝癌细胞株HepG2生长的抑制作用.方法:利用5HRE作为增强子和AFPp构成联合调控元件,与自杀基因NTR构成真核表达载体.将载体转染AFP阳性的人肝癌细胞株HepG2及AFP阴性的人胃癌细胞株MKN45,利用G418筛选稳定转染的细胞.用RT-PCR和Western blotting检测NTR的表达.将前体药物CB1954加入稳定表达NTR基因的细胞,用MTT法观察其毒性代谢产物4-羟胺还原产物对肿瘤细胞生长的抑制作用.结果:成功筛选出稳定表达NTR的单克隆HepG2细胞和MKN45细胞.RT-PCR和Western blotting证实单克隆HepG2细胞中NTR在mRNA和蛋白水平的表达,且缺氧环境中的表达量更高;单克隆MKN45细胞在常氧和缺氧环境中均无NTR表达.MTT法检测发现,缺氧环境下NTR基因能有效地活化前体药物CB1954,剂量依赖性地抑制NTR阳性的HepG2细胞的生长(P<0.05);但对MKN45细胞和野生型HepG2细胞无抑制作用.结论:5HRE和AFPp双重调控的NTR/CB1954自杀基因系统在体外缺氧环境下可促进对人肝癌细胞株HepG2靶向性杀伤作用.
肝肿瘤、NTR/CB1954自杀基因系统、缺氧环境、AFP
16
R656.9(外科学各论)
国家自然科学基金资助项目30672070, 30400430
2009-06-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
125-129