膜结合型干细胞因子促进白血病细胞K562的增殖和集落形成

摘要：

目的: 探讨膜结合型干细胞因子(membrane-bound stem cell factor,m-SCF)在白血病细胞中的作用.方法:克隆并构建携可溶型干细胞因子(soluble stem cell factor,s-SCF)前体的真核表达质粒pTARGET-s,采用Overlap PCR法去除外显子6序列,进一步构建m-SCF的表达质粒pTARGET-m,DNA测序鉴定.通过脂质体介导分别将上述载体和空载体pTARGET转染白血病K562细胞,用G418筛选稳定表达细胞株,并用RT-PCR、Western blotting法鉴定.通过CCK-8细胞增殖实验以及集落形成实验观察不同细胞株体外增殖特点.结果:成功构建了s-SCF和m-SCF的真核表达载体,获得了稳定转染细胞株K562-V、K562-S、K562-M.U底培养条件下,K562-M增殖能力明显高于K562-V和K562-S(均P<0.01).K562-M集落形成率显著高于K562-V 和K562-S (均P<0.01),且集落形态大于其他两种细胞.结论:m-SCF与C-kit之间的并置性作用显著促进白血病细胞的增殖.

关键词：膜结合型干细胞因子、C-kit、白血病、并置性作用

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分类号：R733.7;R392.1(肿瘤学)

资助基金：国家重点基础研究发展规划973前期资助项目2008CB517301;美国中华医学基金会CMB资助项目No.2007001.Supported by the Major State Basic Research Development Program of China2008CB517301;China Medical Board CMBA2007001

在线出版日期：2009-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：6-11