沉默BRCAA1基因对胃癌MGC-803细胞的抑制作用及其可能的机制

摘要：

目的:研究沉默乳腺癌相关抗原1(breast cancer-associated antigen 1,BRCAA1)基因对胃癌细胞株MGC-803的抑制作用及其可能的机制.方法:构建BRCAA1基因shRNA载体,将构建的shRNA-BRCAA1质粒与阴性对照质粒shRNA-N转染胃癌MGC-803细胞,24 h后用荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR检测BRCAA1和GAPDH基因mRNA表达水平.MTT法检测转染后24、48与72 h的细胞增殖水平,Annxin-V PE/7AAD检测转染24 h后的细胞凋亡水平,Western blotting检测转染48 h后细胞的凋亡相关蛋白表达水平.结果:BRCAA1 siRNA表达质粒转染MGC-803细胞24 h 的转染效率为(81.2±2.6)% .转染后48 h MGC-803细胞的BRCAA1 mRNA水平下降了61.4%,MGC-803细胞增殖的抑制率达45.0%,转染siRNA细胞的凋亡率明显高于未转染细胞和对照质粒转染细胞”(14.4±1.6)% vs(5.4±2.0)%,(4.4±2.5)%,P<0.05”.转染siRNA细胞的凋亡相关蛋白Rb与Bax的表达量显著增加(P<0.05),Bcl-2的表达量显著减少(P<0.05).结论:BRCAA1基因的沉默可有效抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其机制与其促进Rb和Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达有关.

关键词：乳腺癌相关抗原基因1、shRNA、胃癌细胞、增殖、细胞凋亡

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分类号：R735.2;R730.54(肿瘤学)

资助基金：国家重点基础研究发展973计划资助项目2005CB723400-G;国家高技术研究发展 863计划重点项目2007AA022004;国家自然科学基金资助项目30771075, 30672147;上海市科委基金资助项目072112006-6

在线出版日期：2009-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：522-526