重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1的抗肿瘤效应及其作用机制

摘要：

目的:探讨外源性p53AIP1(p53-regulated apoptosis-inducing protein 1)基因抗肿瘤效应及其作用机制,以评估p53AIP1基因在肿瘤基因治疗中应用的可行性.方法:构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1,感染人肝癌细胞HepG2,应用MTT比色法、Western blotting、流式细胞术、罗丹明染色以及电镜等观察外源性p53AIP1基因表达对肿瘤细胞的作用及其相关机制.小鼠皮下接种感染Ad-p53AIP1的小鼠乳腺癌4T1细胞,观察Ad-p53AIP1对肿瘤细胞体内成瘤性的影响;建立4T1细胞皮下移植瘤小鼠模型, 直接瘤内多点注射重组腺病毒,观察Ad-p53AIP1的抗肿瘤疗效.结果:感染Ad-p53AIP1的HepG2细胞能够高效表达P53AIP1蛋白.MTT检测显示Ad-p53AIP1对人肝癌细胞HepG2的生长抑制率达50%以上;流式细胞术分析证实p53AIP1使肿瘤细胞周期阻滞于G2/M期;罗丹明染色、电镜观察以及凋亡相关蛋白PARP表达的检测均证实p53AIP1能诱导肿瘤细胞发生明显凋亡.感染Ad-p53AIP1的肿瘤细胞体内成瘤受到非常明显的抑制(P<0.01), Ad-p53AIP1瘤体注射对移植瘤生长也有明显的抑制作用(P<0.05).Western blotting以及RT-PCR检测证实Ad-p53AIP1对p53 mRNA表达无影响,能下调mdm2基因的表达;p53AIP1能上调P53蛋白的表达、下调MDM2蛋白的表达水平,同时还影响P21等细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达.结论:p53AIP1有明显的体内外抗肿瘤作用,其作用机制与其反向调控P53蛋白、调控多种细胞周期和细胞凋亡相关蛋白、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡有关,该基因在肿瘤基因治疗中具有潜在的应用前景.

关键词：p53AIP1、肝癌细胞、细胞周期、细胞凋亡、抗瘤效应、基因治疗

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分类号：R737.5;R730.54(肿瘤学)

资助基金：国家重点基础研究发展规划973资助项目2002CB513105

在线出版日期：2009-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：508-516