苦参碱诱导胶质瘤C6细胞凋亡及其可能的基因机制

摘要：

目的:探讨苦参碱诱导C6胶质瘤细胞凋亡的作用特点和可能的基因作用机制. 方法:MTT法测定不同浓度苦参碱对C6细胞增殖的抑制率,求出IC50值;倒置显微镜及透射电镜观察苦参碱诱导C6细胞凋亡的形态学改变;Annexin/FITC染色流式细胞术检测不同浓度苦参碱诱导C6细胞的凋亡率;实时定量PCR芯片(Real-time PCR Array)检测苦参碱作用后C6细胞凋亡相关基因的差异表达;免疫细胞化学及Western blotting方法检测苦参碱对C6细胞caspase-3表达的影响. 结果:苦参碱对C6细胞增殖的抑制率随着药物剂量的增加(0.1~1.0 mg/ml)而增加(P<0 05),其IC50为0.715 mg/ml.倒置显微镜观察显示苦参碱可诱导胶质瘤细胞出现凋亡改变,透射电镜观察显示苦参碱诱导胶质瘤细胞出现凋亡的超微形态改变,流式细胞术检测显示胶质瘤细胞的凋亡率随着药物剂量的增加(0.2~1.0 mg/ml)而增大[(3.56±0.73)%~(27.55±1.92)%](P<0.05).胶质瘤细胞经苦参碱作用后出现显著表达差异基因共68个,其中57个基因表达明显上调、11个基因表达明显下调,其中有22个基因与诱导凋亡的死亡受体相关,15个基因与线粒体途径有关;ICC及Western blotting检测都显示苦参碱可诱导C6胶质瘤细胞caspase-3表达的上调(P<0.05). 结论:苦参碱能诱导C6胶质瘤细胞的凋亡,其机制与死亡受体途径和线粒体途径的众多基因有关.

关键词：苦参碱、胶质瘤细胞、凋亡、基因差异表达、caspase-3

所属期刊栏目：15

分类号：R739.41;R730.5(肿瘤学)

资助基金：黑龙江省自然科学基金资助项目D 2007-39

在线出版日期：2009-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：451-457