携带PTEN基因重组腺病毒对群司珠单抗耐药乳腺癌细胞的逆转作用

摘要：

目的:研究重组腺病毒介导的野生型PTEN基因转染对群司珠单抗(traxtuzumab)耐药性乳腺癌细胞的逆转作用.方法:构建携带野生型PTEN基因的重组腺病毒AdPTEN,感染群司珠单抗耐药性乳腺癌细胞株BT474, MTT比色法和FCM检测AdPTEN感染对群司珠单抗作用下BT474细胞增殖和凋亡的影响; DNA片段化实验分析BT474凋亡与感染时间的关系; Western blotting法检测AdPTEN感染对BT474细胞中丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)磷酸化水平的影响.建立荷乳腺癌裸鼠模型,观察AdPTEN联合群司珠单抗治疗对乳腺癌移植瘤生长的影响,检测移植瘤细胞中PTEN蛋白的表达、细胞凋亡、超微结构的改变.结果:成功构建重组腺病毒AdPTEN,其滴度为4.2×1011TCID50/ml.PCR、RT-PCR和Western blotting法证实PTEN基因可被转导入BT474细胞内并稳定高效表达.AdPTEN联合群司珠单抗处理对BT474细胞增殖的抑制非常显著地强于单用群司珠单抗治疗(P<0.01);细胞出现明显凋亡,凋亡率为(20.7±5.83)%,并且出现G1期阻滞和S期明显减少,与AdLacZ组和对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01);感染组细胞DNA出现典型的梯形条带, 以感染后24~36 h最为明显; AdPTEN感染明显下调BT474细胞内Akt的磷酸化水平.AdPTEN和群司珠单抗联合治疗可强烈抑制裸鼠移植瘤生长,疗效明显强于群司珠单抗治疗组(P<0.01);AdPTEN治疗后,移植瘤细胞中PTEN表达明显,TUNEL和电镜检测均证实乳腺癌移植瘤细胞的凋亡.结论:AdPTEN治疗可抑制BT474细胞Akt 的磷酸化,阻断PI3K/Akt信号通路的持续活化,恢复耐药细胞对群司珠单抗的敏感性,引起细胞凋亡.

关键词：乳腺癌、群司珠单抗、耐药、PTEN、基因治疗、耐药逆转

所属期刊栏目：15

分类号：R737.9;R730.54(肿瘤学)

资助基金：上海市科学技术委员会资助项目06DZ19509

在线出版日期：2009-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：433-439