PUMA基因转染胰腺癌AsPC-1细胞增强对5-FU致凋亡的敏感性

摘要：

目的:探讨PUMA基因转染是否增强胰腺癌AsPC-1细胞对5-FU致凋亡的敏感性.方法: 采用脂质体转染法将PUMA-pCEP4和空载体pCEP4质粒转染入胰腺癌AsPC-1细胞中,G418筛选阳性细胞.将系列浓度(0.01～100 μmol/L)的5-FU 分别作用于AsPC-1、AsPC-1/PUMA和AsPC-1/pCEP4细胞72 h,MTT法测定各组细胞的存活率并计算IC50, FCM、断裂DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blotting检测各组细胞PUMA蛋白表达的变化.结果: AsPC-1、AsPC-1/PUMA和AsPC-1/pCEP4细胞的5-FU IC50分别为(12±1.9)、(1.6±0 4)和(10.4±1.6)μmol/L,AsPC-1/PUMA细胞对5-FU作用的敏感性增加了7.5倍.5-FU以剂量依赖方式诱导AsPC-1细胞凋亡,但对AsPC-1/PUMA细胞所诱导的凋亡比AsPC-1和AsPC-1/pCEP4 更明显.低浓度5-FU(0.1 μmol/L)轻微引起AsPC-1/pCEP4[(1.14±0.28)%]和AsPC-1细胞凋亡[(0.9±0.23)%],但能诱导AsPC-1/PUMA细胞明显凋亡[(6.47±1.42)%];高浓度5-FU (1μmol/L)诱导各组细胞凋亡,但AsPC-1/PUMA细胞凋亡率[(34.54±9.36)%]明显高于AsPC-1[(12.8±3.74)%]和AsPC-1/pCEP4细胞[(15.8±5.15)%],差异均有统计学意义(P<0.01);FCM、断裂DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测显示相同的结果.PUMA蛋白在AsPC-1/PUMA细胞中的表达明显高于AsPC-1和AsPC-1/pCEP4细胞.结论: PUMA基因转染明显地增强了胰腺癌AsPC-1细胞对5-FU致凋亡作用的敏感性.

关键词：PUMA基因、胰腺癌、5-FU、凋亡

所属期刊栏目：15

分类号：R735.9;R730.54(肿瘤学)

资助基金：卫生部科研项目WKJ 2004-2-001

在线出版日期：2008-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：139-143