融合基因pEGFP-C3-B7.2-hTERT诱导小鼠免疫应答及抑制肝癌移植瘤

摘要：

目的:构建融合DNA疫苗pEGFP-C3-B7.2-hTERT,观察其诱导小鼠免疫应答的能力和抗小鼠肝癌H22细胞移植成瘤的作用.方法:通过RT-PCR扩增B7.2和hTERT cDNA,以pEGFP-C3为载体构建pEGFP-C3-B7.2-hTERT融合基因质粒,肌肉注射接种C57BL/6小鼠,间隔7 d,共3次,以注射接种pEGFP-C3-B7.2、pEGFP-C3-hTERT、pEGFP-C3和PBS为对照.检测免疫小鼠脾淋巴细胞CTL杀伤活性、脾细胞培养上清IL-2和IFN-γ水平、外周血淋巴细胞亚群变化及血清中抗hTERT抗体水平.将融合基因pEGFP-C3-B7.2-hTERT免疫已负荷肝癌细胞H22/hTERT或H22/B7.2的小鼠,观察小鼠成瘤时间、生存时间.结果:琼脂糖凝胶电泳、酶切及序列测定证实,成功构建了融合基因质粒pEGFP-C3-B7.2-hTERT.融合基因免疫小鼠的脾淋巴细胞对B7.2-hTERT阳性靶细胞的杀伤活性明显高于各对照组(P＜0.01),每只pEGFP-C3-B7.2-hTERT免疫小鼠郁产生了抗体,免疫鼠外周血CD4+、CD8+T细胞和脾细胞培养上清中,TH1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平较各对照组明显升高(均P＜0.01).pEGFP-C3-B7.2-hTERT融合基因质粒免疫已负荷肝癌细胞H22/hTERT或H22/B7.2的小鼠后,小鼠60 d未成瘤,其他各组22 d时所有小鼠均已成瘤,60 d时均死亡.结论:DNA疫苗pEGFP-C3-B7.2-hTERT在体内能诱导出明显的B7.2-hTERT特异性的抗肿瘤免疫应答,且能抑制体内已经存在的少量肿瘤细胞的成瘤.

关键词：DNA疫苗、B7.2、hTERT、免疫应答、移植瘤、免疫治疗

所属期刊栏目：15

分类号：R730.54;R735.7(肿瘤学)

资助基金：河南省自然科学基金0411042400

在线出版日期：2008-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：51-55