树形分子递送survivin反义寡核苷酸对HepG2细胞的抑制效应

摘要：

目的: 研究利用聚酰胺(polyamidoamine, PAMAM)树形分子递送survivin基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxy-nucleotide, asODN)抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的效应.方法: 采用第1至第5代的聚酰胺树形分子室温下与反义survivin寡核苷酸混合制备树形分子与反义寡核苷酸的复合物(PAMAM-asODN),应用琼脂糖凝胶电泳及原子力学显微镜观察复合物的形态结构.PAMAM-asODN复合物转染HepG2细胞,同时设survivin反义寡核苷酸转染细胞作对照.共聚焦荧光显微镜检测复合物细胞转染效果;RT-PCR分析转染后细胞survivin mRNA的表达水平;MTT法检测复合物对HepG2细胞增殖的抑制效应.结果: 琼脂糖凝胶电泳分析表明,树形分子与survivin反义寡核苷酸具有高效络合作用,形成了大小为25 nm左右的复合物;共聚焦荧光显微镜检测显示,与对照相比,PAMAM-asODN复合物转染细胞的效率显著提高;RT-PCR的结果表明,转染PAMAM-asODN复合物的肿瘤细胞中survivin mRNA表达显著降低;MTT结果表明,树形分子递送survivin反义寡核苷酸进入细胞后,HepG2细胞增殖明显受抑制,增殖抑制率随培养时间、复合物浓度、树形分子代数的增加而增加,6.0 μmol/L G4.0 PAMAM-asODN与细胞培养96 h可使抑制率达55%以上.结论: PAMAM树形分子能高效递送survivin asODN进入细胞,并抑制HepG2肿瘤细胞的增殖.树形分子可能是一种高效基因药物递送载体,在肿瘤治疗中具有潜在应用价值.

关键词：纳米材料、树形分子、survivin基因、反义寡核苷酸、肝癌细胞、基因治疗

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分类号：R730.54(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30471599;国家重点基础研究发展计划973计划2005CB724300-G;上海市科技发展基金03ZR14057

在线出版日期：2008-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：411-416