Caspase-3 在Apoptin基因诱导Hela细胞凋亡中的作用

摘要：

目的: 研究Caspase-3在Apoptin gene诱导Hela细胞凋亡中的作用.方法: 用含有Apoptin基因的真核表达载体pcDNAA3瞬间转染体外培养的Hela细胞;Hela细胞瞬间转染后0、24、48、72和96 h,分为正常的Hela细胞对照组,pcDNA3.1质粒转染对照组和实验组.分别采用RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测Hela细胞的凋亡;以比色法检测Caspase-3的相对活性.结果: 以转染后24、48和72 h Hela细胞的总RNA 为模板,经RT-PCR均可扩增出Apoptin cDNA, 正常Hela细胞和空载体转染细胞均为阴性表明Apoptin 已在转染细胞中表达;Apoptin基因瞬间转染的Hela细胞可出现典型的细胞凋亡所具有的DNA梯状带, 表明有凋亡发生;FCM检测发现, 以Apoptin基因转染后48 h,在DNA直方上的G1峰前,即出现1个明显的亚2倍体峰(亚G1峰,即凋亡峰),并随着转染时间延长而增强.细胞凋亡率与对照组相比较差异显著(P＜0.05 ).Hela细胞经pcDNAA3质粒转染后24 h实验组Caspase-3的活性开始升高,72 h达高峰,明显高于正常细胞对照组和pcDNA3.1对照组(P＜0.01).结论: Apoptin基因可通过激活Caspase-3诱导Hela细胞凋亡.

关键词：肿瘤特异性凋亡基因、凋亡、Caspase-3、基因治疗

所属期刊栏目：14

分类号：R459.9(治疗学)

资助基金：辽宁省自然科学基金20042046

在线出版日期：2007-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：333-337