人重组caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞靶向促凋亡作用

摘要：

目的:探讨Her 2靶向重组的caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用.方法: 将抗Her 2单链抗体基因e23sFv与绿脓杆菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和活性caspase-6 基因连接,构建成Immunocasp-6(e23sFv-PEⅡ-casp-6)基因,将其克隆入真核表达载体pCMV中,转染SOSP-9607细胞,间接免疫荧光法检测目的基因表达和细胞形态学变化,通过Annexin V染色、流式细胞术、MTT法检测来观察其促肿瘤细胞凋亡的作用.结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测出caspase-6的表达,SOSP-9607细胞出现明显的核浓缩、碎裂;电镜观察到细胞质浓缩,胞内空泡,核染色质浓集等典型的凋亡特征;MTT法检测发现细胞的增殖明显被抑制;Annexin V染色流式细胞术检测可见明显的凋亡细胞,凋亡率为31.4%,较对照组细胞(凋亡率为6.0%)有非常显著的增加(P＜0.01). 结论: 重组Immunocasp-6基因可以在转染的SOSP-9607细胞中表达,并诱导细胞发生凋亡.

关键词：caspase-6、Her 2、融合蛋白、骨肉瘤、细胞凋亡

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分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30330610;国家自然科学基金30471988;中国博士后科学基金2005038259

在线出版日期：2007-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：21-25