siRNA抑制卵巢癌细胞株SKOV3 HPA基因表达的研究

摘要：

目的: 研究siRNA对卵巢癌细胞株SKOV3中乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因表达的抑制作用.方法: 设计合成两对HPA编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,通过定向克隆至载体PGenesil-1,构建siRNA真核表达载体,经稳定转染SKOV3细胞后应用RT-PCR、real-time PCR及免疫组化技术检测卵巢癌细胞中HPA基因mRNA及蛋白表达水平的抑制情况.结果: 测序证实成功地构建了编码2条shRNA的siRNA真核表达载体.通过RT-PCR、real-time PCR及免疫组化技术检测转染siRNA的SKOV3细胞,与对照组相比,HPA mRNA表达水平和蛋白表达水平明显降低.结论:构建的PGenesil-1(+)-HPA重组质粒能有效的抑制HPA基因在卵巢癌细胞株SKOV3中的表达,为研究HPA基因在肿瘤细胞中的调节途径和肿瘤的基因治疗提供了新的方法.

关键词：小分子干涉RNA、HPA基因、卵巢癌

所属期刊栏目：13

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：中国博士后科学基金2005037776

在线出版日期：2006-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：124-128