10.3872/j.issn.1007-385X.2006.01.008
靶向生存素基因siRNA诱导骨肉瘤细胞株U-2OS的凋亡
目的:体外转录合成生存素(survivin)基因siRNA,观察其在骨肉瘤细胞株U-2OS中抑制survivin基因后细胞增殖及细胞凋亡情况.方法:将U-2OS细胞分为A组(空白对照组)、B组(非特异性转染组)、C组(特异性转染组),在荧光显微镜下观察转染前后细胞形态的改变,用RT-PCR和Western blot法分别检测转染前后survivin基因mRNA和蛋白的干涉效果,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并比较各组结果.结果:荧光显微镜下可见转染后细胞增殖变慢,凋亡细胞增加;RT-PCR结果显示survivin siRNA明显抑制survivin基因mRNA表达.Western blot法检测C组蛋白阳性表达率比A、B两组显著降低(P<0.01);特异性转染组的细胞增殖缓慢,与其它两组比较有显著性差异(P<0.01).流式细胞仪检测C组细胞凋亡率与其他两组比较有显著性差异(P<0.01).结论:体外转录合成特异性survivin siRNA能有效抑制U-2OS细胞中survivin mRNA及蛋白表达,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.RNA干扰技术为骨肉瘤的基因治疗提供了一种新策略.
骨肉瘤、RNA干扰、siRNA、生存素基因、凋亡
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R738.1(肿瘤学)
2006-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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