EGF-PE35KDEL嵌合毒素对Hela细胞的毒性作用

摘要：

目的: 构建由人表皮生长因子和绿脓杆菌外毒素A组成的融合蛋白,并检测其对肿瘤细胞的杀伤能力.方法: 利用基因工程技术连接EGF和PE35KDEL基因,克隆到表达载体pET28a中,将其转化至BL21(DE3),在BL21(DE3)以可溶的形式表达EGF-PE35KDEL嵌合毒素,经DEAE-Sepharose FF阴离子交换等层析后,纯度达到95%.结晶紫检测EGF-PE35KDEL对肿瘤细胞的活性.结果: SDS-PAGE和薄层扫描分析外源蛋白的表达量占菌体蛋白的20%.细胞活性检测证明EGF-PE35KDEL能够抑制Hela细胞的生长,IC50为0.07 μg/ml.结论: EGF-PE35KDEL嵌合毒素对体外表达EGFR的Hela细胞有杀伤作用.

关键词：表皮生长因子、绿脓杆菌外毒素、嵌和毒素、细胞毒性

所属期刊栏目：12

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2005-08-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：120-123