TGF-α与绿脓杆菌外毒素融合蛋白的表达、纯化及对肿瘤细胞的杀伤作用

摘要：

目的:表达并纯化转化生长因子α与绿脓杆菌外毒素融合蛋白(TGFα-PEA0),探讨其对EGF受体(EGFR)阳性肿瘤细胞的靶向杀伤作用.方法:用pET28a表达载体构建表达TGFα-PE40蛋白的重组体pV28,IPTG诱导其表达后,提取包涵体蛋白并用Ni柱纯化,MTT法观察复性融合蛋白对肿瘤细胞A431和SK-OV3的杀伤效用.结果:成功构建基因重组质粒pV28,纯化后的包涵体蛋白中TGFα-PFA0蛋白纯度达98%以上,这种活性毒素蛋白对EGFR高表达的A431癌细胞抑制率为50%(IC50)时所需蛋白浓度为(0.86±0.07)μg/ml,低于EGFR低表达的SK-OV3癌细胞的IC50(6.37±2.18μg/ml),差异显著(P＜0.05).结论:融合蛋白TGFα-PE40对肿瘤细胞的毒性与肿瘤细胞表面表达的EGFR数量成正相关,可选择性杀伤肿瘤细胞.

关键词：绿脓杆菌外毒素、TGF-α、融合蛋白、EGF受体、肿瘤

所属期刊栏目：11

分类号：R730.5(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30171507

在线出版日期：2005-02-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：244-247