人PD-L1(B7-H1)基因克隆及其逆转录病毒载体的构建和稳定表达

摘要：

目的:克隆人PD-L1(B7-H1)基因,并构建含有该目的基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达PD-L1基因的L929细胞.方法:从人心脏cDNA文库中扩增出PD-L1基因,通过双酶切装入逆转录病毒载体pGEZ-Term中,脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清感染L929细胞,72 h后,加入Zeocin进行筛选,挑选出能稳定表达PD-L1蛋白的L929细胞株.结果:构建了用于表达的含PD-L1基因的重组逆转录病毒载体;经转染包装细胞293T后,包装出具有感染能力的重组PD-L1逆转录病毒;经RT-PCR、流式细胞仪表型检测表明,筛选出的L929转基因细胞能稳定表达人PD-L1蛋白.结论:构建了含人PD-L1基因重组逆转录病毒载体和稳定表达人PD-L1蛋白的细胞株,为该基因功能的后续研究和单克隆抗体的研制奠定了基础.

关键词：PD-L1、逆转录病毒、稳定表达、筛选

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分类号：R373.9;Q785(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2001CB51003

在线出版日期：2003-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：110-114