人可溶性4-1BBL在毕氏酵母中的表达及其协同刺激效应的研究

摘要：

目的: 通过甲醇营养型毕氏酵母蛋白质表达系统,表达出具有生物活性的人可溶性4-1BBL重组蛋白.方法: PCR方法从XG-4-1BBL转基因细胞中获得4-1BBL的胞外段基因;利用酵母表达载体pPICZαA构建重组质粒pPICZαA-s4-1BBL,经线性化后电转化导入毕氏酵母GS115中,甲醇诱导表达;SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot分析发酵上清中hs4-1BBL蛋白表达水平及其特异性;体外T细胞增殖试验(3H-TdR掺入法)观察rhs4-1BBL 蛋白的生物学活性.结果: (1)成功地扩增到4-1BBL的胞外段基因,酶切鉴定及测序结果与已知的基因序列一致;(2)SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot结果显示所获重组蛋白的分子量与预期分子量(21 kD)相同,并可被4-1BBL特异性抗体识别;(3)重组蛋白在体外具有协同促进T细胞增殖的效应.结论: 成功地在毕氏酵母表达系统中表达出具有生物学活性的人可溶性4-1BBL重组蛋白,为进一步研究其功能奠定了物质基础.

关键词：人可溶性4-1BBL、毕氏酵母、表达、协同效应

所属期刊栏目：10

分类号：R392.1

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划20001CB51003

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：17-20