重组人canstatin的克隆、表达及其活性鉴定

摘要：

目的:克隆并表达canstatin基因,初步检测其抑制血管生成的活性.方法:采用RT-PCR方法从人胚肝组织中钓取canstatin cDNA,克隆人pMD18-T载体中,并测序鉴定.在QIA表达系统中表达,Ni柱亲和层析纯化.进行生物学活性鉴定.结果:经序列分析所获684 bp人canstatin基因与报道一致,重组进pQE30表达载体,IPTG诱导表达并纯化成功,表达产物能明显抑制血管生成.结论:成功构建人canstatin cDNA克隆和表达载体并在大肠杆菌M15中高效表达.纯化回收产物在鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)实验中具有明显抑制血管生成活性.

关键词：canstatin、逆转录聚合酶链反应、克隆、原核表达、活性鉴定

所属期刊栏目：9

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：283-286