血管发生抑制因子restin的克隆表达及其抗血管活性的初步研究

摘要：

目的:克隆人血管发生抑制因子restin(hRS),在E.coli中融合表达,并测定其抗血管活性.方法:用RT-PCR法从中国人胎盘组织中扩增hRS基因,重组入pGEM-T裁体中并测序鉴定,构建原核表达载体pGEX-hRS,表达融合蛋白GST-hRS.融合蛋白经亲和纯化及凝血酶切后,采用鸡胚绒毛膜尿囊膜试验检测其抗血管生成活性.结果:RT-PCR产物为564bp,测序结果与Genbank中胶原XV(COL15A1)的C端序列一致,但在21位(TCT→TCG)引起丝氨酸的同义突变,82位(ACA→TCA)引起丝氨酸突变为苏氨酸.诱导表达的人GST-hRS融合蛋白经凝血酶切后,分子量为20 kD,具有抗血管生成活性.结论:hRS的成功克隆、表达为抗血管生成治疗实体瘤的研究奠定了实验基础.

关键词：restin、克隆、融合表达、抗血管生成活性

所属期刊栏目：9

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：重庆市科委科研项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：194-197