10.3872/j.issn.1007-385X.2002.03.002
TRAIL真核表达治疗肝细胞癌作用的研究
目的: 构建鼠源TRAIL(mTRAIL)真核表达质粒.研究其体内、外表达对肝癌细胞的诱导凋亡作用,抑制肝癌生长作用及与重组人FN多肽真核表达质粒pCH510协同抑制肝癌生长作用.方法: 采用RT-PCR及重组DNA技术构建mTRAIL真核表达质粒;体内、外进行基因转染;用流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡率,用TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL)法及免疫组织化学技术检测肝癌细胞凋亡;小鼠实体瘤块模型研究基因转染抑制肝癌生长作用.结果: 用RT-PCR方法自小鼠脾细胞RNA扩增出TRAIL基因的全长cDNA,并克隆至真核表达载体pcDNA3.1中获重组质粒pX1;以pX1转染BHK细胞株后攻击肝癌细胞株H22细胞,可检测到肝癌细胞凋亡;肌肉内注射转染质粒DNA pX1,通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制肝癌生长;pX1与FN多肽真核表达质粒pCH510有协同抑制肝癌生长作用.结论: 质粒pX1可在细胞及小鼠体内表达;体内、外表达可诱导肝癌细胞凋亡并可通过该机制抑制肝癌生长;与FN多肽真核表达质粒pCH510有协同抑制肝癌生长作用.
TRAIL、重组FN多肽、肝癌、基因治疗
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Q78;R735.7(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金39870763;教育部跨世纪优秀人才培养计划
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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