hTNF-α重组腺病毒转染人肺腺癌细胞的体外生物学特性及体内抗肿瘤研究

摘要：

目的:研究携带hTNF-α基因的第二代重组腺病毒对人肺腺癌细胞系Ani973的体外生物学特性的影响,探讨重组腺病毒在体内抗肿瘤作用.方法:将携带有hTNF-α基因的重组腺病毒(rAd-hTNF-α)感染人肺腺癌细胞系,通过细胞生长实验、克隆形成实验、流式细胞分析、形态学检查等观察其对Anip973肿瘤细胞的作用;利用PCR技术对转染后的细胞进行检测并应用ELISA试剂盒检测转染后的细胞TNF-α的分泌量;通过肿瘤局部注射rAd-LacZ,rAd-hTNF-α的方法观察其在小鼠体内的抗肿瘤作用.结果:rAd-hTNF-α经扩增、纯化后,滴度可达1010PFU/ml,在30 MOI时,对Anip973细胞的转染率达90%以上.转染的Anip973肿瘤细胞除表面结构和超微结构有轻微变化外,其生长能力、克隆形成率及细胞周期等无明显变化.24h细胞培养上清TNF-α的分泌量为20 pg/ml细胞.体内实验表明注射rAd-LacZ,rAd-hTNF-α的小鼠肿瘤生长缓慢,体积明显小于对照组(P＜0.05),生存期显著延长.结论:腺病毒介导的细胞因子基因hTNF-α转染的Ani一73肿瘤细胞未见明显变化,而体内实验则有明显的抗肿瘤作用.

关键词：重组腺病毒、肿瘤、基因治疗、细胞因子

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分类号：R730.5(肿瘤学)

资助基金：黑龙江省自然科学基金D0122

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：113-116