V型腺病毒纤维蛋白基因真核表达质粒的构建及表达

摘要：

目的:构建腺病毒纤维蛋白基因的真核表达质粒,并检测其在真核细胞中的表达,为腺病毒靶向性载体构建创造条件.方法:采用限制性内切酶技术,酶切腺病毒骨架质粒pAdEasy-1,经多次亚克隆,最后完成克隆纤维蛋白基因并构建其真核表达质粒.用脂质体法将构建好的真核表达质粒瞬时转染COS-7细胞,于转染后72 h,用Western blot法检测所表达的蛋白.结果:克隆成功纤维蛋白基因,并构建纤维蛋白基因真核表达质粒pcDNA/Fiber,经限制性内切酶酶切鉴定及测序证实了其正确性.Western blot结果显示,新表达蛋白在变性条件下大小为62 kD,而在非变性条件下为186 kD.结论:纤维蛋白基因真核表达质粒能在真核细胞中表达,产物具有三聚体结构,可用于腺病毒靶向性载体的构建.

关键词：腺病毒、纤维蛋白、表达载体、基因转染、真核细胞

所属期刊栏目：9

分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金39970834;军队科研项目01Z087

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：27-31