10.3872/j.issn.1007-385X.2002.01.004
可溶性VEGF受体FLT-1克隆、表达及其对血管生成的抑制作用
目的:克隆VEGF受体sFLT-1片段1-3区,并使之在原核中进行表达以探讨其对内皮细胞增殖和血管生成方面的抑制作用.方法:提取脐静脉血管内皮细胞总RNA,克隆sFLT-1基因1-3区,并使之在QIA表达系统进行表达;Ni2+-Sepha-rosee 6B亲和层析纯化、复性.应用MTF和鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型,探讨重组蛋白对血管生成的抑制作用.结果:该表达系统能表达sFLT-1基因片段,表达量低.纯化后,经复性,sFLT-1具有与VEGF特异结合功能,1μg重组sFLT-1蛋白能抑制10ngVEGF诱导的脐静脉内皮细胞增殖和20 ng VEGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成.结论:sFLT-1基因片段能在QIA表达系统中得到表达,复性后重组蛋白具有与VEGF结合和拮抗VEGF生物学活性的功能.
血管内皮细胞生长因子、FLT-1、原核表达、血管新生
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R730.21(肿瘤学)
上海市卫生局资助项目9924
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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