提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺

摘要：

目的： 通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离，以提高bFGF目的蛋白表达量。方法： 以Klenow和Mung Bean Nuclease通过增加2个及减少2个碱基调整SD序列和ATG之间距离，SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白表达量，以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果： 获得了重组质粒pLX2，pLX3，诱导后与表达质粒pLX1（7.78%）相比，表达量分别为8.03%，9.9%，经纯化后获得的bFGF纯度达98%，ED50为2.29 ng/ml。结论： 调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量,从而提高了目的基因在大肠杆菌中的表达水平。

关键词：bFGF、ATG、SD 序列、表达、纯化

所属期刊栏目：8

分类号：R392.2

资助基金：国家科技攻关项目96-C02-01-03

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：142-144