10.3872/j.issn.1007-385X.2000.04.028
卵巢癌p16基因异常表达的临床研究
@@卵巢癌发病率逐渐上升,现跃居妇癌首位,死亡率高,目前尚无早期诊断方法。
p16是一抑癌基因,其产物P16蛋白竞争性地与CDK4,CDK6结合,抑制后者的激酶活性,从而控制细胞的增殖,其异常与肿瘤的进展和不良预后有关。探索其与临床分期、组织学分级及预后的关系,可应用于临床,对卵巢癌早期诊断,提供治疗选择的参考依据,从而改善预后有重要的意义。
为探讨p16抑癌基因与卵巢癌发生、发展及预后的关系。本研究收集1996年1月至1999年6月妇科手术切除卵巢癌36例,病检为卵巢浆液或粘液性乳头状囊腺癌。按FIGO(1985)分期,I期10例,Ⅱ期7例,Ⅲ期17例,Ⅳ期2例。采用PCR及S-P法检测卵巢癌p16基因的状况及表达,应用PCR-SSCP技术检测p16基因有无突变及缺失。p16基因质粒由美国Cool Spring Harbor实验室Beach博士惠赠;PCR试剂盒购自GENF公司。p16抑癌基因引物:5'GGG、
GCG、 CGG、 CTG、 GAC、 GTG、 C-3', 5 '-GAG、 GGA、 CCT、 TCC、
GCG、GCA、TC-3'
配对扩增长度为
154 bp;5'-ACA、AGC、TIC、
CTI、 TCC 、 GTC 、 ATG、 CCG-3' , 5 '-CCA、 GGC、 ATC 、 GCG、 CAC、
GTC、CA-3'配对扩增长度为243 bp。均按试剂盒说明操作,结果与标准质粒PCR-SSCP图谱一致,无突变,如出现丢失,为缺失。应用S-P法检测P16蛋白的表达,p16抗体购自美国Maxim公司,按说明书操作,切片不着色者为阴性(-);瘤细胞淡黄染色<15%为弱阳性(+);瘤细胞深黄或棕黄色染色15%~50%为阳性( );呈棕褐色染色>50%为强阳性( )。结果,卵巢癌PCR-SSCP检测结果与标准p16质粒图谱比较,无明显的突变差异,但有9例缺失,p16基因缺失占25%,卵巢良性肿瘤及正常对照组未检出p16基因突变及缺失。
p16、卵巢癌
7
R737.3(肿瘤学)
云南省应用基础研究项目97C073M
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共1页
305