10.13455/j.cnki.cjcor.2021.04.20
MiR-433抑制Notchl和PAX6表达对视网膜母细胞瘤恶变的影响研究
目的 探讨miR-433抑制Notch1和PAX6表达对视网膜母细胞瘤(RB)恶变的影响.方法 选取2015年1月至2020年1月间西安市第四医院收治的行手术切除并经病理检查确诊的RB组织50例(未接受放疗前),同时取正常视网膜组织50例.采用qRT-PCR方式分析RB细胞与正常视网膜组织中miR-433表达水平,采用MTT法分析miR-433、miR-433表达抑制(miR-433 Ctrl)和miR-433过表达(anti-miR-433)对RB细胞系增殖与凋亡的影响,采用Western blotting法检测 miR-433、miR-433 Ctrl 和 anti-miR-433对蛋白 Notch1 和 PAX6表达的影响.结果 Notch1 和PAX6在正常视网膜组织中表达阳性率为20.0％和24.0％,在RB组织中表达阳性率为80.0％和76.0％,组间比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).同正常视网膜组织相比,RB细胞中miR-433的表达水平更低,提示miR-433可能在RB的发育中发挥了重要作用.将RB细胞系分别使用miR-433、miR-433 Ctrl 和 anti-miR-433进行转染,并于转染24h、48h、72h 及96h 时使用 MTT 检测法,分析RB细胞系增殖凋亡情况.细胞增殖方面,anti-miR-433抑制RB细胞增殖,miR-433 Ctrl促进 RB 细胞增殖,24h、48h、72h 和96h 时,miR-433 Ctrl 组 RB 细胞增殖＞miR-433组＞anti-miR-433组(P＜0.05).细胞凋亡方面,anti-miR-433提高RB细胞凋亡水平,miR-433 Ctrl会提高RB细胞抗凋亡能力,组间比较,24h、48h、72h和96h时,miR433 Ctrl组RB细胞活性＞miR-433组＞anti-miR-433组(P＜0.05).开展蛋白质印迹分析发现,anti-miR-433组RB细胞Notch1和PAX6蛋白表达水平最低,其次为miR-433组,miR-433 Ctrol组最高.结论 miR-433可特异性地作用于Notch1和PAX6蛋白靶基因,以影响RB细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭.
miR-433、Notch1、PAX6、视网膜母细胞瘤、恶性变化
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R739.72(肿瘤学)
2021-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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