10.3969/j.issn.1000-8179.2018.21.889
TRPV6对结肠癌SW480细胞生物学行为及小鼠模型中结肠肿瘤发生的影响
目的:通过观察沉默瞬时受体阳离子通道亚家族V成员6(transient receptor potential cation channel,subfamily V member 6,TRPV6)对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响和细胞内钙的浓度变化,以及1,25(OH)2D3、CaCl2及CuCl2在SD大鼠结肠肿瘤模型建立中的影响,探索TRPV6在结肠癌发生过程中的相关作用,为结肠癌的防治寻找新的靶点.方法:通过构建慢病毒颗粒感染结肠癌SW480细胞,采用免疫组织化学法、Western bolt、PCR技术检测TRPV6蛋白及mRNA的表达,MTT法、迁移及凋亡实验观察结肠癌SW480细胞增殖、迁移及凋亡变化,高速离子成像系统测定结肠癌SW480细胞内的Ca2+浓度变化.以二甲基肼(dimethyl hydrazine,DMH)建立SD大鼠结肠肿瘤模型,分为实验组(DMH组)和干预组[(DMH+1,25(OH)2D3组、DMH+CuCl2组)]、对照组,干预组分别予1,25(OH)2D3 (37.5 nmol/kg)、CuCl2(375μmol/kg)对模型进行干预.观察各组大鼠结肠腺瘤及腺癌的发生情况,Western blot检测各组结肠组织中TRPV6蛋白的表达情况.结果:TRPV6-RNAi转染结肠癌SW480细胞后,TRPV6 mRNA及蛋白表达减少,细胞Ca2+浓度水平降低,结肠癌SW480细胞的增殖率、迁移能力下降,细胞凋亡率增加,与空白对照组及阴性对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05).对照组大鼠成瘤率为0,DMH+1,25(OH)2D3组为100%,DMH组为84.62%,DMH+CuCl2组为33.33%.各组大鼠大肠中均有TRPV6蛋白的表达,表达情况为DMH+1,25(OH)2D3组>DMH组>DMH+CuCl2组>对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:降低结肠癌SW480细胞Ca2+浓度水平可抑制结肠癌SW480细胞的增殖、迁移能力,诱导细胞凋亡.1,25(OH)2D3可以增加实验鼠结肠组织TRPV6蛋白表达,促进结肠肿瘤的形成.CuCl2可以使实验鼠结肠组织中的TRPV6蛋白表达降低,并抑制结肠肿瘤的形成.
TRPV6、基因沉默、钙离子通道、结肠癌、二甲基肼
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Guizhou International Science and Technology Cooperation Program No.G20147014 本文课题受贵州省国际科技合作计划项目[黔科合G字20147014]资助
2018-12-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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