10.3969/j.issn.1000-8179.2013.13.003
EGCG诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡相关基因的差异表达*
目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)诱导人胃癌 MGC-803细胞凋亡的生物学效应,并探讨其分子机制。方法:运用DNA含量分析、Annexin Ⅴ/PI双标记法、DNA琼脂糖凝胶电泳以及透射电子显微镜形态学方法来观察细胞凋亡。通过SuperArray人细胞凋亡基因芯片检测100μmol/L EGCG作用于MGC-803细胞12 h后凋亡相关基因的表达谱,采用 RT-PCR 和 Western blot 技术验证上调基因 Fas-L 和下调基因 Bag-1。结果:25、50、100、200μmol/L EGCG 作用于MGC-803细胞24 h后,DNA含量分析出现了明显的亚二倍体峰;100μmol/L EGCG作用4、8、12、24 h后,Annexin Ⅴ/PI双标记法表明早期凋亡细胞显著增加。100μmol/L EGCG作用24 h后,在琼脂糖凝胶上电泳可见DNA凋亡特征性的阶梯状条带。电子显微镜观察到细胞体积缩小,核浓缩和凋亡小体形成等典型的形态学改变。通过基因芯片检测发现,100μmol/L EGCG作用12 h后有8个凋亡相关基因表达差异显著,选择其中 Fas-L 和 Bag-1运用 RT-PCR 和 Western blot 技术进行验证,其结果与基因芯片一致。结论:EGCG能够诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡,这可能是多个基因和多条信号转导通路共同作用的结果。
胃肿瘤、表没食子儿茶素没食子酸酯、凋亡、基因芯片
R73;R74
the Scientific Research Foundation of the Department of Education of Hunan Province No.11C1158.本文课题受湖南省高校科研项目编号11C1158
2013-07-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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