10.3969/j.issn.1000-8179.2013.09.010
miR-25在人胃癌组织中的表达分析及其靶基因TOB1的鉴定
目的:分析miR-25在胃癌组织中的表达水平并鉴定其新的靶基因.方法:选取10例胃癌患者的胃癌及癌旁正常组织样本,用qRT-PCR法检测miR-25的表达水平.利用miRNA靶基因预测数据库预测miR-25的靶基因.构建荧光素酶载体(pMIR-TOB1)及绿色荧光蛋白报告载体(pMIR-GFP-TOB1)(含有miR-25结合位点的TOB1的3'UTR片段),利用荧光素酶活性实验和GFP荧光强度报告实验鉴定miR-25的预测靶基因(TOB1).qRT-PCR法和Western blot法分别检测TOB1的mRNA和蛋白质的表达水平.结果:miR-25在80%(8/10)的胃癌组织样本中表达上调.miR-25模拟物显著抑制了荧光素酶的活性(P<0.01)和GFP荧光强度.miR-25模拟物显著下调了AGS细胞中TOB1的mRNA(P<0.05)和蛋白质的表达.结论:miR-25在人胃癌组织中表达上调,miR-25能结合TOB1的3'UTR并下调TOB1的mRNA和蛋白质的表达.
miR-25、TOB1、胃癌
2013-05-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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