Fas通路通过激活ERK1/2通路在结肠癌细胞中诱导上皮-间质转化*

摘要：

目的:探索Fas通路在结肠癌细胞中诱导上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的分子机制.方法:分别对结肠癌细胞SW480及DLD1予以低剂量FasL(12.5 ng/mL)处理.作用3d后分别提取实验组和对照组细胞的总蛋白、总RNA,并进行Western blot、RT-PCR检测,分析FasL作用下结肠癌细胞的上皮标记物、间质标记物以及EMT相关的转录因子的表达状况.在低剂量FasL作用3d后行免疫荧光检测,观察EMT相关转录因子在细胞内的分布情况.建立稳定敲除Snail及Twist的结肠癌细胞系,再予以低剂量FasL刺激,采用Western blot、RT-PCR检测是否发生EMT过程.对结肠癌细胞SW480予以低剂量FasL(12.5 ng/mL)处理后,通过Western blot检测实验组和对照组细胞ERK1/2通路及p38通路的激活状况.对SW480细胞进行信号通路抑制剂的预处理,再予以低剂量FasL刺激,采用Western blot、RT-PCR检测是否发生EMT过程,从而探索Fas通路诱导EMT的可能机制.结果:低剂量FasL可使结肠癌SW480和DLD1细胞的上皮标记物表达下调,间质标记物表达上调,EMT相关转录因子在细胞核周聚集,细胞发生梭形改变,提示发生EMT.而将结肠癌细胞的Snail或Twist基因敲除后,FasL的上述诱导作用明显减弱.低剂量FasL可激活结肠癌细胞的ERK1/2通路激活,而ERK抑制剂可减弱FasL诱导的EMT过程.结论:Fas通路可能通过激活ERK1/2通路诱导结肠癌细胞发生EMT.

关键词：结肠癌、上皮间质转化、Fas通路

在线出版日期：2013-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：500-504