10.3969/j.issn.1000-8179.2013.01.003
Girdin对恶性胶质瘤细胞增殖和运动能力的影响
目的:观察抑制恶性胶质瘤LN229细胞中Girdin蛋白的表达对细胞运动的影响,并探讨其分子机制.方法:用小RNA干扰技术降低恶性胶质瘤细胞株LN229中Girdin蛋白的表达水平,通过Western blotting技术验证其降表达效率,并筛选出稳定降表达的克隆命名为siGirdin/LN229,阴性对照组命名为scr/LN229.利用增殖实验检测LN229细胞的存活率;应用划痕实验和侵袭实验检测细胞的运动变化.通过慢病毒感染技术来提高Girdin在LN229细胞中的表达水平,使用嘌呤霉素筛选2周建立稳定的细胞系,并用Western blot验证Girdin表达水平.结果:Western blotting验证小RNA干扰技术有效沉默了LN229细胞中Girdin的表达.增殖实验显示siGirdin/LN229细胞增殖能力下降(P<0.05),至第6天时实验组细胞数为(19.98±2.54)×104;对照组细胞数为(61.04±5.26)×104.划痕实验发现细胞非定向运动能力减弱(P<0.05),24 h时实验组细胞运动的距离为(21.83±2.52)μm;对照组为(44.16±2.89)μm.Western blotting结果表明LN229细胞中Girdin的表达增高,增殖实验显示过表达Girdin对LN229细胞增殖能力无影响.体外细胞侵袭实验中实验组穿过Matrigel胶的细胞数为(14.67±2.08)个;对照组为(32.67±3.06)个,结果显示 Girdin降表达后细胞的侵袭能力较对照组细胞显著下降(P<0.05).结论:Girdin和胶质瘤细胞增殖和运动能力密切相关,Girdin蛋白表达降低可抑制LN229细胞的增殖、迁移和侵袭能力.
胶质瘤、Girdin、增殖、细胞运动
2013-01-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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