基于iTRAQ标记结合2D nano HPLC-ESI-OrbiTrap MS/MS技术筛选卵巢癌血清标记物

摘要：

目的:利用相对和绝对同位素标记(iTRAQ)和纳升级两维高效液相色谱-电喷雾-OrbiTrap质谱(2D nano HPLC-ESI-OrbiTrap MS/MS)蛋白组学方法探寻卵巢癌血清标记物,以提高早期卵巢癌诊断率.方法:收集卵巢癌患者血清20例(卵巢癌组),CA125异常的卵巢良性囊肿16例(良性囊肿组),健康者20例(正常对照组),每组取10例组内等量混合后去除高丰度蛋白,iTRAQ试剂标记,进行强离子交换柱分离多肽、nanoLC分离并在线连接电喷雾串联OrbiTrap质谱分析,筛选出重要的差异蛋白.随后采用Western blot方法,将筛选出的重要差异蛋白进行56例临床血清样本逐例验证.结果:共鉴定出差异蛋白326个.其中重点筛选出了8个重要的差异蛋白:蛋白PARD3、SRPl-alpha、LAMA4、LRP16、IgSF2、NRAMP1、NF-E2-related factor 1和APOA4；验证了3个重要差异蛋白:PARD3、NRAMP1、APOA4.结论:应用iTRAQ标记的定量蛋白质组学技术筛选出了8个重要的差异蛋白,可能是潜在的肿瘤标记物.其中APOA4蛋白有可能成为区分恶性与良性卵巢疾病的生物标志物.

关键词：卵巢癌、蛋白质组学、肿瘤标志物、iTRAQ

所属期刊栏目：39

分类号：R44;R54

资助基金：本文课题受新疆维吾尔自治区自然科学基金2011211A038

在线出版日期：2013-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2075-2079