10.3969/j.issn.1000-8179.2012.23.005
siRNA干扰沉默Slug基因表达抑制结肠癌细胞HCT116生长和侵袭的研究
目的:研究RNA干扰Slug表达对结肠癌细胞HCT 116生长和侵袭的影响,并探讨Slug对E-钙黏素(E-cadherin)的调控作用.方法:将表达Slug siRNA的3个载体pGenesi-l/Slug siRNA1-3和阴性对照pGenesi-lNC分别转染HCT 116细胞,反转录PCR(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测Slug mRNA和蛋白的表达.选取干扰效果最强的质粒转染细胞,采用噻唑蓝(MTT)染色检测细胞的增殖活性,细胞划痕和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力.RT-PCR和Western blot检测抑制Slug表达后,E-cadherin mRNA和蛋白的表达水平变化.结果:3条Slug siRNA干扰序列均能有效抑制Slug表达,其中Slug siRNA3干扰效果最强:与阴性对照相比,mRNA和蛋白水平分别下降了85%和80%.Slug siRNA3组HCT 116细胞生长速度显著低于对照组(P<0.05),划痕愈合的速度以及侵袭至Matrigel胶上的平均细胞数量明显低于对照组(P<0.05).干扰Slug的表达能够显著上调E-cadherin的表达.结论:RNA干扰Slug基因能够抑制结肠癌细胞生长及侵袭,其机制可能与上调E-cadherin有关.
E-钙黏素、RNA干扰、细肠癌细胞HCT116、侵袭
2012-12-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
1886-1889