慢病毒载体介导RNA 干扰抑制Livin 对人大肠癌HT-29细胞生物学行为的影响

摘要：

目的:探讨慢病毒载体介导RNA干扰(RNAi)抑制大肠癌细胞系HT-29细胞Livin基因表达对其生物学行为的影响.方法:设计、合成靶向Livin的siRNA,构建pGCSIL-GFP慢病毒载体,采用Real-time PCR和Western blot方法观察对人大肠癌HT-29细胞Livin mRNA及蛋白质表达的抑制;并通过台盼蓝拒染法、原位末端标记法(TUNEL)、流式细胞术及Matrigel穿膜侵袭实验检测细胞增殖、凋亡、细胞周期及细胞侵袭性的变化.结果:重组慢病毒Livin-RNAi-LV1能够有效抑制Livin的表达,使Livin mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01);Livin沉默能抑制HT-29细胞增殖(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.01),细胞周期重新分布,G0/Gl期细胞比例升高(P<0.05),S期细胞比例降低(P<0.05),G2/M期细胞比例降低(P<0.05).HT-29细胞体外侵袭能力也明显减弱(P<0.01).结论:利用慢病毒载体介导RNA干扰技术沉默Livin基因的表达可以抑制大肠癌HT-29细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞侵袭性减弱.

关键词：慢病毒载体、RNA干扰、Livin、大肠癌、凋亡

所属期刊栏目：39

分类号：R73;S85

资助基金：本文课题受国家自然科学基金30960440

在线出版日期：2012-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1060-1064