IFN―γ联合阿霉素或依托泊苷增强TRAIL 对神经母细胞瘤细胞的诱导凋亡作用

摘要：

目的:探讨半胱-天冬氨酸蛋白酶8(Caspase 8)和死亡受体(DR)在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导神经母细胞瘤(NB)细胞凋亡中的作用.方法:应用RT-PCR方法检测γ干扰素(IFN-γ)作用前后NB细胞Caspase 8 mRNA的表达;应用Western blot 方法检测Caspase 8、DR4 和DR5 蛋白表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞术检测IFN-γ,TRAIL,IFN-γ +TRAIL,Caspase 8 抑制剂+ TRAIL 及IFN-γ+阿霉素/依托泊苷+TRAIL对NB细胞株生长及凋亡的影响.结果:IFN-γ在NB细胞株SKNDZ中诱导了Caspase 8 mRNA及蛋白表达.SY5Y细胞对TRAIL不敏感,而IFN-γ与TRAIL或阿霉素/依托泊苷联用对SY5Y细胞有明显诱导凋亡作用.IFN-γ+TRAIL组SY5Y细胞早期凋亡率(23.09±2.35)%高于TRAIL 组[(6.15±0.54)%(P<0.01)],但低于IFN-γ+阿霉素/依托泊苷+TRAIL 组[(43.41±6.46)%/(38.86±7.29)%,P<0.01].阿霉素或依托泊苷可以诱导NB细胞株DR5蛋白表达,但未诱导DR4蛋白表达.IFNγ诱导后表达Caspase 8的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用仍不敏感,而阿霉素或依托泊苷处理后同时表达DR5的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用相对敏感.IFN-γ+阿霉素/依托泊苷+TRAIL组SKNDZ细胞早期凋亡率(11.54±2.49)%/(13.38±1.65)%高于IFN-γ+TRAIL 组(P<0.01).结论:IFN-γ上调Caspase 8表达及化疗药阿霉素或依托泊苷诱导DR5表达可以恢复NB细胞对TRAIL的敏感性,Caspase 8和DR5在TRAIL诱导NB细胞凋亡中起着十分关键的作用.

关键词：神经母细胞瘤、IFN-γ、阿霉素、依托泊苷、凋亡

所属期刊栏目：39

分类号：R73;R97

资助基金：本文课题受国家自然科学基金30950021、81101528

在线出版日期：2012-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：365-368,376