10.3969/j.issn.1000-8179.2009.02.008
REGγ基因沉默对甲状腺髓样癌细胞凋亡的影响
目的:研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)方法抑制蛋白酶体激活剂REGγ的基因表达对人甲状腺髓样癌TT细胞株凋亡的影响.方法:培养人甲状腺髓样癌TT细胞株,构建真核表达载体pREGγ-shRNA及阴性对照质粒pNeg-shRNA,在脂质体Lipofectamine2000的介导下转染人甲状腺髓样癌TT细胞株,采用RT-PCR和Western Blot法检测pREGγ-shRNA转染和pNeg-shRNA转染的TT细胞之间REGγmRNA及REGγ蛋白质表达之间的差别;然后采用TUNEL法检测REGγshRNA转染和阴性质粒转染的TT细胞的凋亡率之间的差别,以及Westem Blot法检测pREGγ-shRNA转染和pNeg-shRNA转染的TT细胞凋亡因子Caspase-3表达之间的差别.结果:真核表达载体pREGγ-shRNA转染TT细胞的REGγ mRNA和REGγ蛋白表达水平明显低于pNeg-shRNA转染的TT细胞(P<0.05),pREGγ-shRNA转染的TT细胞的凋亡水平明显高于pNeg-shRNA转染的TT细胞(P<0.05).结论:应用siRNA技术能有效的抑制人甲状腺髓样癌细胞REGγ基因的表达,抑制蛋白酶体激活剂REGγ基因的表达能明显地促进TT细胞的凋亡,提示REGγ可阻止细胞凋亡.REGγ在人甲状腺髓样癌细胞凋亡中的地位,为肿瘤的生物学治疗提供了新的思路.
REGγ、小干扰RNA、甲状腺髓样癌
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R73;R68
文课题受国家自然科学基金资助30670811
2009-03-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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