HPV16 E6 E7 siRNA作用于人宫颈癌细胞株的实验研究

摘要：

目的:使用HPV16 E6、E7 siRNA处理表达HPV16阳性的人宫颈鳞癌细胞株CaSki和SiHa,观察其对HPV16 E6、E7原癌基因的特异性抑制作用,为探讨使用siRNA治疗宫颈癌的可行性提供实验基础.方法:分别设计并合成靶向于HPV16 E6、E7的siRNA各3条,经脂质体包裹后转染两株细胞,分别采用RT-PCR和Western Blot方法,通过对转染前后各时间段两基因mRNA及蛋白的表达情况的检测,验证RNAi作用的特异性及时效性.结果:同对照组相比,各E6、E7 siRNA均可引起靶基因表达水平的显著性下降(P＜0.05);而空脂质体组及阴性对照siRNA组的靶基因表达水平则无明显变化.其中E6-1 siRNA和E7-2 siRNA对靶基因抑制作用较强.E6-1 siRNA和E7-2 siRNA转染两株细胞后24h、48h、72h及96h均可观察到靶基因表达的显著性降低(P＜0.05),而对相应的非靶基因无明显抑制作用.结论:不同序列的E6、E7 siRNA,对靶基因的干扰效率不同;E6、E7 siRNA分别作用于宫颈鳞癌细胞株,均引起了靶基因的特异、高效性的抑制,而时非靶基因的表达无明显变化,且抑制作用至少维持到转染后96h.为进一步研究采用RAN干扰技术进行宫颈癌的生物治疗奠定了基础.

关键词：siRNA、E6、E7、HPV16、宫颈癌

所属期刊栏目：35

分类号：R73;TQ6

资助基金：本文课题受国家自然科学基金资助30660192

在线出版日期：2009-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1236-1240