Bcl-2短发夹状RNA对NB4细胞株生长的抑制作用

摘要：

目的:构建Bcl-2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的表达载体并研究其对早幼粒白血病细胞株NB4生长的抑制作用.方法:针对Bcl-2基因构建编码shRNA序列的重组表达载体,经酶切电泳和DNA测序鉴定.采用脂质体介导的转染方法将重组的RNAi质粒转入NB4细胞后,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察转染效率,采用Western Blot检测Bcl-2蛋白表达水平;采用MTT法测定细胞增殖情况.结果:编码Bcl-2 shRNA的RNA序列被正确地插入到预期位点.将两个Bcl-2 shRNA载体分别转入NB4细胞后,Bcl-2蛋白表达水平均降低,与转染阴性shRNA及未转染组比较,均有显著性差异(P＜0.05).转染Bcl-2 shRNA1、shRNA2载体入NB4细胞在72、96h细胞生长明显受到抑制,分别与转染阴性shRNA、单纯载体组及未转染组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论:构建的两个Bcl-2 shRNA均可特异性地抑制NB4细胞生长.

关键词：Bcl-2、shRNA、RNAi、NB4细胞

所属期刊栏目：33

分类号：R551.3(血液及淋巴系疾病)

资助基金：广东省自然科学基金04010446

在线出版日期：2006-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1277-1279,1287