人miR-29b过表达慢病毒载体的构建及其对A549细胞迁移的影响

摘要：

[目的]构建能高效表达人miR-29b的慢病毒载体,研究其对人肺腺癌A549细胞迁移的影响.[方法] PCR扩增miR-29b前体序列,克隆入慢病毒表达载体,测序鉴定.包装好的慢病毒感染A549细胞,流式细胞仪分选后用荧光定量PCR检测miR-29b表达水平,划痕实验观察过表达miR-29b对A549细胞迁移的影响.[结果]测序结果证明成功构建人miR-29b过表达慢病毒载体.miR-29b过表达慢病毒感染效率为88.56％,使A549细胞中miR-29b表达升高2.78倍.与A549细胞相比,稳定过表达miR-29b的A549-miR-29b细胞的迁移能力显著性降低.[结论]成功构建miR-29b过表达慢病毒载体,过表达miR-29b可抑制A549细胞的迁移,为进一步研究miRNA对肿瘤转移的调控作用奠定了基础.

关键词：miR-29b、慢病毒载体、细胞迁移

所属期刊栏目：24

分类号：R730.23(肿瘤学)

资助基金：广东省医学科研基金A2014278;广州市属高校科研项目2012C135;2012C202;广州医科大学博士启动科研项目2014C08;2012C14

在线出版日期：2015-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：593-597