过表达人骨保护素的乳腺癌细胞克隆的构建

摘要：

[目的]建立过表达人骨保护素(OPG)的MDA-MB-231乳腺癌细胞克隆.[方法]从pOTB7-OPG上获得OPG基因片段并用PCR方法扩增,将其连接于真核表达质粒plRES2-EGFP,酶切鉴定及测序后,转染MDA-MB-231细胞,以G418加压筛选,对转染细胞行单克隆化,稳定转染细胞行RT-PCR和Westem blot检测,确定其OPG mRNA和蛋白表达情况,MTT法检测过表达OPG对MDA-MB-231细胞生长速率的影响.[结果]成功构建了pIRES2-EGFP-OPG重组质粒;稳定转染细胞的OPG mRNA和蛋白表达均较对照升高;过表达OPG对MDA-MB-231细胞生长速率无明显影响.[结论]成功建立了过表达OPG的MDA-MB-231细胞克隆,为进一步深入探讨肿瘤细胞自身OPC表达在乳腺癌骨转移发生发展巾的作用提供实验基础.

关键词：乳腺肿瘤、骨保护素、MDA-MB-231细胞、质粒

所属期刊栏目：17

分类号：R73-3;R737.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30700814;第三军医大学中青年科研基金

在线出版日期：2009-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：981-984