ARMS实时PCR和MALDI-TOF-MS进行K-ras基因分型

摘要：

[目的]建立K-ras基因12位密码子第一、二位点基因分型的研究模型.[方法]采用ARMS实时PCR和MALDI-TOF-MS两种方法,以自行构建的质粒DNA为模板,建立K-ras基因12位密码子第一、二位点基因分型的研究模型.[结果]在相同的扩增条件下,采用ARMS实时PCR方法,第一个位点的野生型和突变型的△Ct值至少为8,但第二个位点野生型和突变型的△Ct值仅为1～2左右.第二个位点改用MALDI-TOF-MS分型方法,采用一条公用引物和dATP,ddTTP,ddCTP和ddGTP的混和物,12密码子第二位点基因分型可以准确检测.[结论]ARMS实时PCR方法分析速度快,操作简便,但它需要合适的反应条件及高质量模板.MALDI-TOF-MS分型方法虽然步骤较多,但准确度高,反应体系稳定并具有高通量潜力.

关键词：基质辅助激光解吸飞行时间质谱、扩增阻碍突变系统方法、实时PCR、基因分型、K-ras基因、基因突变

所属期刊栏目：14

分类号：R73-3(肿瘤学)

资助基金：福建省自然科学基金C0220002

在线出版日期：2005-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：256-260