人癌胚抗原cDNA的克隆与真核表达质粒的构建

摘要：

[目的]将人癌胚抗原(CEA)cDNA克隆到真核表达载体pIRES中,构建真核表达质粒pIRES-CEA,以期在哺乳动物细胞中高效、稳定表达,并为下一步连接上热休克蛋白基因(HSP70)从而构建CEA-HSP融合核酸疫苗作准备.[方法]从CEA阳性的大肠癌组织中提取总RNA,经RT-PCR方法获取人癌胚抗原cDNA,用内切酶Xba Ⅰ和Not Ⅰ分别酶切质粒pIRES和CEA cDNA,通过T4连接酶将带有黏性末端的CEA-cDNA插入到pIRES质粒的XbaⅠ和NotⅠ酶切位点上.[结果]通过PCR扩增获得了CEA基因,并将CEA-cDNA正向克隆到载体pIRES中.[结论]已经成功构建了真核表达质粒pIRES-CEA,并为下一步连接上热休克蛋白基因(HSP70)从而构建CEA-HSP融合核酸疫苗作准备.

关键词：癌胚抗原、基因克隆、载体构建、核酸疫苗

所属期刊栏目：14

分类号：R73-3(肿瘤学)

资助基金：福建省自然科学基金C0130014

在线出版日期：2005-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：119-121