痤疮丙酸杆菌亚油酸异构酶在毕赤酵母中的异源表达及其静息细胞催化合成共轭亚油酸

摘要：

来源于痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)的亚油酸异构酶(PAI)是一种能够通过单酶催化,生成共轭亚油酸(t10,c12-CLA)的亚油酸异构酶.为实现PAI的高效表达,以pPink为表达载体,毕赤酵母(PichiaPinkTM Strain2)为宿主菌,构建毕赤酵母重组菌株(Pichia-pPink-His-opai),实现了PAI在毕赤酵母中的异源表达.对毕赤酵母重组菌进行初步筛选获得蛋白表达量最高的转化子,通过单因素实验优化毕赤酵母重组菌的诱导条件.毕赤酵母重组菌最佳诱导条件为:诱导时间24 h,诱导剂甲醇体积分数2％.在最佳诱导条件下,将毕赤酵母重组菌制成静息细胞催化剂催化合成t10,c12-CLA.在28℃、200 r/min、亚油酸质量浓度4g/L、反应时间6h条件下,t10,c12-CLA产量为2.12 g/L,转化率可达53％.

关键词：毕赤酵母;亚油酸异构酶;异源表达;共轭亚油酸;静息细胞催化

所属期刊栏目：46

分类号：Q786;TQ645.6(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金优秀青年基金31722041

在线出版日期：2021-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：87-91