曲美他嗪对心肌缺血再灌注损伤大鼠钙蛋白酶的调控及其对细胞凋亡的作用机制

摘要：

目的:探讨美他嗪对心肌缺血再灌注损伤大鼠钙蛋白酶(Calpain)的调控及其对细胞凋亡的作用机制.方法:采用随机数字表法将30只SD大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组和曲美他嗪干预组,每组10只.Sham组大鼠仅置缝线但不结扎冠状动脉,其余两组大鼠均采用手术结扎大鼠心肌冠状动脉左前降支(LAD)进行造模,造模期间,Sham组和模型组大鼠给予0.9％氯化钠溶液灌胃处理,曲美他嗪干预组大鼠给予曲美他嗪20 mg/kg灌胃处理.采用苏木精-伊红染色法观察各组大鼠心肌组织情况,以速率法对肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)等心肌酶指标水平进行测定;采用DNA原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡情况,并应用免疫组织化学法检测心肌组织中Caspase-3、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白表达水平;通过荧光分光光度计测定荧光强度来体现Calpain活性,并采用蛋白质印迹法测定焦亡相关蛋白表达水平[核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、Caspase-1 P10蛋白、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和白细胞介素1β(IL-1β)].结果:Sham组大鼠心肌细胞核清晰可辨,心肌纤维整齐排列,胞浆均匀着色;模型组大鼠心肌细胞核浓缩,心肌纤维排列混乱,细胞变性呈空泡状,且可伴有炎症细胞浸润;曲美他嗪干预组大鼠心肌细胞间质呈轻度水肿,心肌纤维排列无异常.Sham组大鼠未发生心肌梗死;曲美他嗪干预组大鼠心肌梗死面积较模型组显著缩小(P<0.05);模型组和曲美他嗪干预组大鼠心肌酶CK、LDH水平均明显高于Sham组,其中曲美他嗪干预组各项心肌酶指标水平均低于模型组(P<0.05),差异均有统计学意义.Sham组中可见少量心肌细胞凋亡,模型组中心肌细胞呈弥漫分布,凋亡数量明显增多;经曲美他嗪干预后,心肌细胞凋亡明显减少.与Sham组相比,模型组大鼠Caspase-3蛋白表达水平明显升高,Bal-2蛋白水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,曲美他嗪干预组大鼠Caspase-3蛋白表达水平明显降低,Bal-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),差异均有统计学意义.模型组大鼠缺血/再灌注(I/R)心肌细胞Calpain活性明显高于Sham组和曲美他嗪干预组,差异有统计学意义(P<0.05),Sham组与曲美他嗪干预组大鼠I/R心肌细胞Calpain活性的差异无统计学意义(P>0.05).模型组和曲美他嗪干预组大鼠NLRP3、IL-1β、ASC和Caspase-1 P10蛋白表达水平均明显高于Sham组,曲美他嗪干预组各项焦亡蛋白相关水平均低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:曲美他嗪可通过抑制Calpain活性来减轻细胞凋亡,进而起到减轻心肌缺血再灌注损伤大鼠心脏损伤的作用.

关键词：曲美他嗪、心肌缺血再灌注损伤、钙蛋白酶、细胞凋亡

所属期刊栏目：23

分类号：R972+.3(药品)

资助基金：国家自然科学基金;川北医学院附属医院院级课题

在线出版日期：2023-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：16-20