地西他滨通过DNA甲基化调控增强结直肠癌细胞中miR-1271-5p的表达和作用

摘要：

目的:探讨地西他滨(5-Aza-dC,decitabine,DAC)在结直肠癌细胞miiR-1271-5p表达调控中的作用和机制.方法:生物信息学分析miR-1271-5p在结直肠腺癌组织和正常结直肠组织中的表达水平,荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人结直肠癌细胞系(SW620、HCT116和LOVO)和正常结肠上皮细胞NCM460中miR-1271-5p的表达水平.Western blot验证过表达miR-1271-5p后对HCT116和LOVO细胞增殖和迁移的作用.生物信息学软件预测miR-1271-5p启动子区甲基化岛,甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测miR-1271-5p启动子区的甲基化水平.使用DAC分别处理HCT116和LOVO细胞,MSP和qRT-PCR分别检测DAC对miR-1271-5p启动子甲基化状态和表达的影响.在2种结直肠癌细胞中转染miR-1271-5p抑制物(inhibitor),并同时使用DAC处理细胞,平板克隆实验、Transwell实验和Western blot实验检测细胞的增殖和迁移能力.结果:miR-1271-5p在结直肠腺癌组织和癌细胞中表达均显著下调.miR-1271-5p过表达可显著促进上皮细胞标志物E-cadherin的表达,抑制间质细胞标志物Vimentin及增殖标志物PCNA的表达.miR-1271-5p的启动子区存在多个甲基化岛,且结直肠癌细胞中miR-1271-5p启动子区的甲基化水平显著高于正常结直肠细胞.DAC处理后,HCT116和LOVO细胞中miR-1271-5p启动子区的甲基化水平显著降低,miR-1271-5p的表达显著增强,DNMT3B的表达显著降低.DAC可逆转miR-1271-5p低表达对结直肠癌细胞增殖和迁移的促进作用.结论:抑癌分子miR-1271-5p在结直肠癌细胞中的低表达与其启动子区的高甲基化状态有关,DAC可通过降低miR-1271-5p启动子区的甲基化水平增强其表达,并恢复其抑癌作用.

关键词：miR-271-5p、结直肠癌、地西他滨、DNA甲基化、细胞增殖和迁移

所属期刊栏目：43

分类号：R737.25(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;宁夏自然科学基金项目

在线出版日期：2023-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2016-2022