灵芝多糖微乳诱导结直肠癌肿瘤相关巨噬细胞M1极化及其联合PD-1抑制剂协同抗肿瘤研究

摘要：

目的:验证灵芝多糖微乳诱导结直肠癌肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)M1极化能力,以及联合PD-1抑制剂协同抗肿瘤的可行性.方法:采用"一步成乳法"制备灵芝多糖微乳(GLP-M),并对其进行理化性质表征.借助RAW264.7细胞考察GLP-M诱导巨噬细胞极化的能力;通过Transwell小室法考察GLP-M处理巨噬细胞后对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响,以及GLP-M处理肿瘤细胞后对巨噬细胞极化的影响;考察GLP-M诱导巨噬细胞产生活性氧(ROS)行为.建立荷MC38鼠源肠癌细胞的皮下移植瘤模型,以生理盐水和灵芝多糖为阴性对照和剂型对照组,设置GLP-M、PD-1抑制剂以及GLP-M+PD-1联合给药组;PD-1抑制剂每3天尾静脉注射1次,给药2次,其余制剂每天灌胃1次,给药6次.考察治疗期间肿瘤生长曲线、体质量变化、生存时间、病理切片等.结果:GLP-M粒径为(58.3±2.1)nm,Zeta电位为(-23.5±1.8)mV,多分散系数(PDI)为0.221±0.003,包封率为(82.5±3.2)％,TEM图显示GLP-M形态圆整、分散均匀.GLP-M干预IL-4诱导的RAW264.7细胞后CD86的表达量升高(33.2±1.9)％,ROS水平升高(39.4±2.5)％,差异均具有统计学意义.在RAW264.7与MC38细胞共培养模型中,GLP-M可以显著提高肿瘤细胞的增殖抑制率和凋亡率,促进巨噬细胞的CD86表达.体内抗肿瘤实验显示:GLP-M、PD-1以及GLP-M+PD-1的肿瘤抑制率分别为(44.3±4.2)％、(51.3±2.7)％和(63.7±4.3)％.GLP-M+PD-1组45 d生存率最高(25％),且该组肿瘤切片结果显示坏死明显,细胞增殖被显著抑制.结论:GLP-M可能通过干预TAMs M1极化的机制提高与PD-1抑制剂等免疫治疗协同抗结直肠癌治疗效能.

关键词：灵芝多糖、微乳、免疫微环境、PD-1抑制剂、协同治疗、结直肠癌

所属期刊栏目：43

分类号：R282;R91(中药学)

在线出版日期：2023-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：278-284