10.13286/j.1001-5213.2020.18.06
藁本内酯通过调控miR-133b-5p表达对脂多糖所致心肌损伤的保护作用
目的:探讨藁本内酯(LIG)对脂多糖(LPS)所致心肌损伤的影响及分子机制.方法:用质量浓度为10 mg·L-1的LPS处理心肌细胞,记为LPS组,正常培养的细胞为对照(Con)组;用浓度分别为10,20,40 μmol·L-1的藁本内酯处理心肌细胞后再用10 mg·L-t的LPS处理,作为藁本内酯低、中、高浓度组;将miR-NC、miR-133b-5p转染至心肌细胞中再用10 mg·L-1的LPS处理,记为LPS+ miR-NC组、LPS+ miR-133b-5p组;将anti-miR-NC、anti-miR-133b-5p转柒至心肌细胞中再用40 μmol·L-1的藁本内酯、10 mg·L-1的LPS处理,记为LPS+LIG+ anti-miR-NC组、LPS+LIG+ anti-miR-133b 5p组.酶联免疫吸附法(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-a)、白细胞介素-6(IL-6)水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Westernblot)法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-133b-5p表达水平.结果:藁本内酯低、中、高浓度处理后,LPS诱导的心肌细胞中TNF-α、IL-6水平显著降低,细胞凋亡率显著降低,Bcl-2表达水平显著升高,Bax表达水平显著降低,miR-133b-5p表达水平显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05).miR-133b-5p过表达可抑制LPS诱导的心肌细胞中TNF-α、IL-6水平和细胞凋亡.抑制miR-133b-5p表达逆转了藁本内酯对LPS所致的心肌细胞损伤的保护作用.结论:藁本内酯通过上调miR-133b-5p表达可抑制LPS诱导的心肌细胞凋亡和炎症反应,对LPS诱导的心肌损伤具有保护作用.
藁本内酯、miR-133b-5p、脂多糖、心肌损伤
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R285(中药学)
河南省科技厅科技攻关项目编号:172102310066
2020-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
1932-1936