基于mTOR通路的大黄素对肾小管上皮细胞转分化的干预作用机制研究

摘要：

目的:观察大黄素(EMO)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化(EMT)的干预效应及对mTOR信号通路的影响,探讨大黄素防治糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的可能作用机制.方法:将体外培养的人肾小管上皮细胞HK-2分为正常组(NG组,5.56 mmol·L-1葡萄糖)、高糖组(HG组,60 mmol· L-葡萄糖)、大黄素组(EMO组,60 mmol·L-1葡萄糖+ 10μmol·L-1大黄素),在用MTT证实大黄素对正常培养的HK-2细胞无毒性的基础上,选择一个有效的药物浓度,以mTOR特异性抑制剂雷帕霉素(20 nmol· L-1)作为对照.各组细胞培养72 h时后,倒置显微镜观察HK-2细胞形态.Western blot法检测细胞中mTOR、P70S6K、4-EBP1蛋白磷酸化水平;免疫荧光法检测α-SMA以及E cadherin蛋白分布及表达.结果:高糖可以诱导HK-2细胞形态由多边鹅卵石样发生纤维化样改变,激活mTOR、P70S6K、4-EBP1蛋白磷酸化,降低细胞中上皮表型蛋白E-cadherin的表达,并增加间质表型蛋白a-SMA的表达.大黄素可以改善高糖导致的HK-2细胞形态的变化,降低mTOR、P70S6K、4 EBP1蛋白磷酸化水平,E-cadherin表达的减少及α-SMA表达的增加,雷帕霉素也能达到与大黄素相同的效果.结论:大黄素可以改善高糖诱导的HK-2细胞上皮间质转分化,此效应可能与抑制mTOR信号通路有关.

关键词：高糖、肾小管上皮细胞、大黄素、EMT、mTOR

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：江苏省药学会-天晴医院药学基金Q2019105;江苏省泰州市人民医院院级科研基金ZL201831

在线出版日期：2019-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1729-1733